蛋白表达
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发布时间：2020-04-29|
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水稻胚乳细胞生物反应器高效重组蛋白表达平台OryzHiExp特点介绍
选择具有储藏功能的水稻胚乳细胞作为生物反应器，采用胚乳细胞特异性表达的启动子、人工定点突变增强启动子的转录水平、蛋白定向储存、内质网减负和密码子优化等综合技术，使重组蛋白特异性地在水稻胚乳细胞中表达，并定向储存在蛋白体中，获得了较高的重组蛋白的表达，使得重组蛋白产量由mg级别提高到20g级别。
项目实施阶段
| 阶段 | 具体项目 | 实验周期 |
| 第一阶段 获取目的基因品系种子 |
基因优化合成 | 1个月 |
| 载体构建 | 1个月 | |
| 愈伤组织诱导/筛选高表达量植株/表达量检测 | 4个月 | |
| 幼苗移栽与培育/获得10-20株阳性T0代种子 | 6个月 | |
| 第二阶段 获得可稳定遗传纯合子种子 |
T0代种植筛选/获得阳性T1代种子 | 4个月 |
| 筛选最少5株以上高表达量的植株品系 | 1个月 | |
| T1代高表达纯合子种植/筛选纯合品系/获得T2代种子 | 4个月 | |
| 表达量与蛋白质生物活性分析鉴定 | 1个月 | |
| 第三阶段 纯化工艺小试 |
设计和开发符合纯度需求的小试纯化工艺开发，获得mg-g级的纯化小试工艺样品 | 6个月 |
可以实现
1、大分子蛋白，分子量可以覆盖从100-1000个氨基酸大小；
2、小分子多肽：分子量小于100个氨基酸；
3、每kg糙米的目标蛋白表达量在0.1g-10g。
特别适用于：
1、生物制药，比如疫苗、靶向蛋白/抗体药、非靶向治疗蛋白药物；
2、工业生物酶，比如诊断用酶、生物制药工艺用酶；
3、生命科学研究工具酶等产品。
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